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超高分辨率和共聚焦顯微鏡值得擁有

更新時間:2022-12-01      點(diǎn)擊次數(shù):4834


超高分辨率和共聚焦顯微鏡


一、MINFLUX


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MINFLUX 平臺優(yōu)秀的成像能力,使您可分辨分子尺度的三維結(jié)構(gòu)。

這種分子尺度的分辨率以及極快的速度可顯示更多的細(xì)節(jié)。

MINFLUX 目前是分辨率較好的熒光顯微鏡之一。
單子分子納米尺度的分辨率以及超乎尋常的速度可揭示從未看見過的細(xì)節(jié)。

MINFLUX 是強(qiáng)大的熒光顯微鏡之一。


清晰度比共聚焦顯微鏡高 100 倍

雖然以前的超高分辨率方法影響力很大,但未能實(shí)現(xiàn)單個熒光分子尺度的分辨率。MINFLUX 基于全新和革命性的定位原理,最終實(shí)現(xiàn)了該目標(biāo)。

十倍于傳統(tǒng)超高分辨,百倍于共聚焦熒光成像的跨越,

MINFLUX 是精確和超高光子效率的熒光分子定位方式。

通過新型 MINFLUX 系統(tǒng),第一款可在生物樣品中實(shí)現(xiàn)大視場 (10 x 15 μm) 和1-3 nm (3D) 空間分辨率的商用熒光顯微鏡。

追蹤速度比相機(jī)快 100 倍

MINFLUX 可以高達(dá) 10 kHz 的頻率追蹤分子,即以 100 µs 間隔解析分子運(yùn)動。這比普通基于相機(jī)的追蹤快 100 倍。當(dāng)然,追蹤在所有三個方向即沿 x、y 和 z 軸進(jìn)行。由于每次定位只需要少量光子,因此能以高時空分辨率監(jiān)測單個分子(以 20 nm 分辨率進(jìn)行 28,000 次定位)。

MINFLUX 是最快的定位熒光分子的方式之一。

通過其革命性的 MINFLUX 顯微鏡,以高的時間分辨率在分子追蹤方面達(dá)到了一個新水平,為各學(xué)科的生命科學(xué)家開啟了嶄新的大門。

一鍵式切換 MINFLUX 分子成像與分子追蹤!


高分辨率

熒光發(fā)射

MINFLUX 定義了一種全新的超高分辨方法,充分利用了 STED 顯微鏡和單分子定位技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):

1) 單一時間只激活單個熒光發(fā)射,以獲得最佳分子區(qū)分效果,

2) 熒光發(fā)射的光分布采用中心零強(qiáng)度(而非最大強(qiáng)度)法以執(zhí)行定位。這從根本上減少了實(shí)現(xiàn)精確定位所需的發(fā)射光子數(shù)量。激發(fā)光束的中心零強(qiáng)度法通過執(zhí)行亞納米探測步驟搜索發(fā)射分子。零強(qiáng)度點(diǎn)離分子越近,所產(chǎn)生的熒光度越低。通過優(yōu)化實(shí)現(xiàn)低發(fā)射速度,MINFLUX 顯微鏡將放大分子,從而提高所顯示的分子位置精度。

將激發(fā)光束的暗影中心與分子位置匹配,最大限度地減少熒光通量,可靠地定位分子,3D 精度達(dá)單分子納米級別!

通過發(fā)射最小化而不是大化,MINFLUX 定位有如下特點(diǎn):

i) 與生俱來的快速,

ii) 不丟棄弱發(fā)射的分子,

iii) 減少了漂白,并且 對漂移的依賴性更小。

iv) 未知分子取向和翻振對相機(jī)質(zhì)心定位精確性產(chǎn)生的嚴(yán)重影響被排除。


標(biāo)準(zhǔn)鏡體

MINFLUX 系統(tǒng)采用了標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡鏡體,可提供從各種不同的選項(xiàng),包括寬場熒光顯微鏡、DIC 顯微鏡、相差顯微鏡、共聚焦和 STED 顯微鏡、直至 MINFLUX。為了提高耐久性,我們制造 MINFLUX 系統(tǒng)時在堅固的光學(xué)臺面上采用可靠的,久經(jīng)時間考驗(yàn)的元件來組裝。


進(jìn)行納米分辨率的實(shí)驗(yàn)時,極微小的樣品漂移和移動就能影響性能。因此,我們的 MINFLUX 采用了主動亞納米穩(wěn)定技術(shù)。MINFLUX成像時,基于激光照明基準(zhǔn)標(biāo)記的全自動穩(wěn)定系統(tǒng)使樣品保持靜止,三維上殘留的波動 < 1 nm。


  • 線頻高于 100 kHz:掃描速度比任何其他方法快 100 倍

  • 單分子納米定位精度:分辨率比共聚焦顯微鏡高 100 倍

  • 每 100 µs 定位一次:追蹤熒光分子比相機(jī)快 100 倍



二、INFINITY

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INFINITY 平臺是具有定制化特性的平臺,以滿足各種有關(guān)顯微鏡的需要。無論是 STED 和共聚焦顯微鏡、活體顯微鏡、材料科學(xué)還是光學(xué)捕獲,INFINITY 都能勝任挑戰(zhàn)。

INFINITY 是高度靈活開放的平臺,即使在購買多年后,也可擴(kuò)展和升級。它可配用所有和任何定制開發(fā)功能,成為真正適合您大多數(shù)成像需求的顯微鏡。

INFINITY 顯微鏡采用自由放置在光學(xué)臺面上的標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)和光機(jī)部件組裝。

INFINITY 顯微鏡標(biāo)準(zhǔn)鏡體是 Olympus IX83,正置型、倒置型、甚至這兩者都配置在同一顯微鏡上,我們都可以做到。

同樣的模塊化也可保證以極快的速度推出新的研發(fā)成果 – 例如我們新型的 MATRIX 探測器。

INFINITY 軟件具有高度靈活性。如果沒有量身定制的軟件,那么量身定制硬件將沒有任何意義,因此,我們開發(fā)了一款應(yīng)用程序,可在后臺實(shí)現(xiàn)對所有定制硬件的底層控制。同時,該程序還向用戶提供成像所需的所有高級功能:一維到四維的共聚焦和 STED 成像模式,以及高級數(shù)據(jù)后處理。

我們的 easyCommander(右)可簡化您的工作流程,幫助您直觀地完成任務(wù)。只需按下一個按鈕,它就會自動針對個性化的染料和樣品應(yīng)用設(shè)置,同時為您提供充分的靈活性來優(yōu)化設(shè)置,極大程度發(fā)掘您的樣品。為了更輕松地成像:請放心,F(xiàn)ACILITY 軟件也可在 INFINITY 系列上運(yùn)行。



多色激光掃描共聚焦和 STED 顯微鏡

性能

可觸及光機(jī)設(shè)計,開放式電子和軟件平臺,幫助實(shí)現(xiàn)您自己的成像構(gòu)想

性能上不妥協(xié) – 獲得 STED 顯微鏡優(yōu)秀的分辨率表現(xiàn)

我們提供極大的靈活性,根據(jù)您的應(yīng)用來定制顯微鏡。



三、FACILITY

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FACILITY 平臺可作為您的主力儀器,提供極其出色的 STED 超高分辨率和共聚焦成像品質(zhì)。它將先進(jìn)的顯微鏡與超級易用性集于一身。我們的軟件可確保新手只需三次點(diǎn)擊,就可直觀地獲得好的圖像,同時也賦予專家對儀器的全面掌控。


FACILITY

理想成像選擇

我們的 FACILTY 系統(tǒng) 是一款真正的顯微顯納鏡,同時具有易用性。它具有多種高級功能,通過極簡操作,就可獲得高共聚焦和超高分辨率圖像。自適應(yīng)照明 (DYMIN、RESCUE、MINFIELD)、自適應(yīng)光學(xué), EASY3DSTED、共聚焦和 STED 自動聚焦、 RAINBOW光譜探測和全 自動校準(zhǔn)。


超級體驗(yàn)

我們的新軟件采用全新設(shè)計,新手只需三次點(diǎn)擊,就可直觀地獲得STED 圖像;同時,通過快速學(xué)習(xí),專業(yè)用戶可以全面操控儀器。全新的工作流程使您之前看到的相形見絀。



樹視圖"中的所有圖像采用分層編組,樣品從超大概覽圖到最終圖像之間的測量信息都會被保存。這樣,STED 和共聚焦測量結(jié)果可始終與樣品大環(huán)境保持著空間相關(guān)性,只需按下按鈕,就可切換不同的模式。無需縮小圖像以找到理想?yún)^(qū)域,然后再放大圖像以調(diào)整諸如像素尺寸,線頻率等設(shè)置,然后拍攝,之后再次縮小,重新調(diào)整像素大小……所有這些在 FACILITY 上只需一次點(diǎn)擊就可完成。另外,樹視圖支持拖放(右)將設(shè)置轉(zhuǎn)移到其他圖像。一旦針對樣品調(diào)整好設(shè)置,您可以將它們迅捷的應(yīng)用于所有圖像,就像在本例中,將設(shè)置從完成的 “細(xì)胞 1"拖拽應(yīng)用到名為“細(xì)胞 2"的新感興趣區(qū)域。

樹視圖支持拖放


FACILITY 軟件同時支持新用戶和高級用戶。在輸入樣品所用的染料名稱后,系統(tǒng)將會自動匹配激發(fā)波長、探測波段、STED 參數(shù)等所有信息。之后,您只需要選擇成像區(qū)域,第一次掃描就已經(jīng)能提供好的超分辨率圖像。其后是非常容易的設(shè)置優(yōu)化過程。

所有功能在便利標(biāo)簽中分組,可逐步升級以適應(yīng)不同等級的用戶。在上例中,光路控制面板展開,首先顯示基本物鏡和針孔控制參數(shù),而更高級用戶可提高一個等級以操控門控和探測設(shè)置。這樣,你只看到當(dāng)前所需的內(nèi)容,避免了有大量按鈕的雜亂屏幕,新用戶不會感到無所適從,而高級用戶可以掌控。

自由選擇ROIs

FACILITY 軟件可實(shí)現(xiàn)拼圖掃描,在每次掃描中,您可選擇任意數(shù)量的感興趣區(qū)域(ROIs,對應(yīng)樹視圖中的對象,見上)。每個ROI本身可再次作為概覽圖,這意味著您可方便地從樣品大概覽圖下探到詳細(xì)的超高分辨率圖,而所有空間信息都被保存。當(dāng)然,即使在 STED 模式中,F(xiàn)ACILITY 也支持任意旋轉(zhuǎn)的ROI!

強(qiáng)大的分析工具,提供 Hyugens SVI 支持

采集完圖像后,我們的軟件可提供強(qiáng)大的分析功能,諸如測量等,而且圖像可發(fā)送到 Huygens SVI 進(jìn)行拼接、反卷積和渲染。

樹視圖"中的所有圖像采用分層編組,樣品從超大概覽圖到最終圖像之間的測量信息都會被保存。這樣,STED 和共聚焦測量結(jié)果可始終與樣品大環(huán)境保持著空間相關(guān)性,只需按下按鈕,就可切換不同的模式。無需縮小圖像以找到理想?yún)^(qū)域,然后再放大圖像以調(diào)整諸如像素尺寸,線頻率等設(shè)置,然后拍攝,之后再次縮小,重新調(diào)整像素大小……所有這些在 FACILITY 上只需一次點(diǎn)擊就可完成。另外,樹視圖支持拖放(右)將設(shè)置轉(zhuǎn)移到其他圖像。一旦針對樣品調(diào)整好設(shè)置,您可以將它們迅捷的應(yīng)用于所有圖像,就像在本例中,將設(shè)置從完成的 “細(xì)胞 1"拖拽應(yīng)用到名為“細(xì)胞 2"的新感興趣區(qū)域。

樹視圖支持拖放


FACILITY 軟件同時支持新用戶和高級用戶。在輸入樣品所用的染料名稱后,系統(tǒng)將會自動匹配激發(fā)波長、探測波段、STED 參數(shù)等所有信息。之后,您只需要選擇成像區(qū)域,第一次掃描就已經(jīng)能提供好的超分辨率圖像。其后是非常容易的設(shè)置優(yōu)化過程。

所有功能在便利標(biāo)簽中分組,可逐步升級以適應(yīng)不同等級的用戶。在上例中,光路控制面板展開,首先顯示基本物鏡和針孔控制參數(shù),而更高級用戶可提高一個等級以操控門控和探測設(shè)置。

自由選擇ROIs

FACILITY 軟件可實(shí)現(xiàn)拼圖掃描,在每次掃描中,您可選擇任意數(shù)量的感興趣區(qū)域(ROIs,對應(yīng)樹視圖中的對象,見上)。每個ROI本身可再次作為概覽圖,這意味著您可方便地從樣品大概覽圖下探到詳細(xì)的超高分辨率圖,而所有空間信息都被保存。當(dāng)然,即使在 STED 模式中,F(xiàn)ACILITY 也支持任意旋轉(zhuǎn)的ROI!

強(qiáng)大的分析工具,提供 Hyugens SVI 支持

采集完圖像后,我們的軟件可提供強(qiáng)大的分析功能,諸如測量等,而且圖像可發(fā)送到 Huygens SVI 進(jìn)行拼接、反卷積和渲染。



四、STEDYCON

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STEDYCON 可將現(xiàn)有的寬場顯微鏡升級到分辨率可達(dá) 30 nm 的共聚焦顯微鏡和 STED 顯納鏡。其要求是配備相機(jī)自由接口和優(yōu)質(zhì)物鏡。STEDYCON 采用超直觀用戶界面,提供智能顯微鏡平臺,任何用戶只需幾分鐘培訓(xùn),就能獲得高品質(zhì)的超高分辨率圖像。只需按下一個按鈕,就可定義您的實(shí)驗(yàn),獲得高品質(zhì)圖像!


STEDYCON

超級緊湊和穩(wěn)定

STEDYCON 超級緊湊,只有鞋盒大小,但卻是功能強(qiáng)大的共聚焦和 STED 顯微鏡。它通過相機(jī)端口連接到顯微鏡機(jī)架上。

STEDYCON 無需維護(hù)保養(yǎng):激光束已在設(shè)計時校準(zhǔn)。因此,無需校準(zhǔn)系統(tǒng),就可始終確保日常可靠工作。


使用非常簡單

使用 STEDYCON 軟件節(jié)省時間:只需幾分鐘培訓(xùn),就可獲得 STED 和共聚焦圖像。由于包含強(qiáng)大的染料數(shù)據(jù)庫,只需最少的用戶輸入,即使對于未知樣品,只需 3 次點(diǎn)擊,就可獲得第一張 STED 圖像!


永遠(yuǎn)準(zhǔn)確聚焦

STEADYFOCUS 激光與成像光路平行排列。無需分色鏡,對成像無任何干擾。

自動聚焦激光器使用干擾成像的分色鏡耦合到光路中。

我們的 STEADYFOCUS 可保持焦點(diǎn)位置穩(wěn)定。始終穩(wěn)定。在 STED 成像過程中,當(dāng)掃描樣品或進(jìn)行數(shù)小時成像時,無需重新聚焦,STEADYFOCUS 可替代您完成。所需的一切都被集成到 STEDYCON 頭中,因此,它也可在正置型顯微鏡上工作!

使用非常簡單

新用戶只需幾分鐘培訓(xùn)

強(qiáng)大的染料數(shù)據(jù)庫,最大限度減少用戶輸入

多位成像,讓顯微鏡替代你工作


可靠、自動化和使用簡單,這就是 STED 顯微鏡的工作方式!




上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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